Nat Neurosci:对小鼠,非人类灵长类动物和人类中功能不同的中间突触进行病毒操作

2022-01-31 06:24:05 来源:
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大规模的mRNA组学术研究正在迅速揭示在特定细胞各种类型里面那时候解读与神经信念结核病无关的性状。理解和外科手术后这些结核病的新方法将需要类似物和驱使特定神经纤维非典型的新方法。因此,在非有机体类人猿和有机体里面接触这些老年人已变得至关重要。重组腺无关病毒(rAAVs)是在神经系统里面进行性状引导的首选新方法,对特定的神经纤维社会群体不能内在的自由依赖性。系统的进一步提高子发现早就通过容许以单细胞清晰度进行mRNA组和表观遗传学学术研究的技术的最新发展而得到加速。但对于进一步提高子自由选择的抓取空间仍然非常大。为了集里面我们的进一步提高子自由选择,作者自由选择除此以外学术研究Scn1a的调节局面,Scn1a是在不同神经纤维社会群体里面解读的性状,其摧毁与严重的抑郁症病无关。结合用作易位易位体细胞DNA(scATAC-seq)数据的单细胞精确测量与衔接种群的性状组保守性借助于,作者在该性状附近提名了十个候选调节性状组。作者确定了三种进一步提高子,共同类似物解读Scn1a的神经纤维社会群体的广度。其里面,一种特定的短调节性状组能够将病毒解读受限制为解读PV的皮质里面间神经纤维(PV cIN)。

新方法:四名受试者(两名男性/两名女性,年龄22-57岁)不感兴趣了一项外科手术后,切除了大脑组织(颞叶和鲎体)以外科手术后耐药性抑郁症。在所有的病例里面,每个参与者都曾不感兴趣过一次初步的手术后,放置硬膜下和/或最深处线圈进行颅内监测,以确定抑郁症发作的位置。从鲎和颞叶取300μm腌渍,在鲎腌渍里面,病毒的类似物是基底膜地理分布。在接种病毒后7~14d对人才的人腌渍进行电生理历史纪录。将人才的人腌渍转移到历史纪录室。对固有膜和放电特性进行分析。DDT分别维持在17.8–26.1℃和30–70%的宏观高温和湿润之内。这些参数被密切监测和控制在啮齿昆虫聚居室。从斯坦福大学(MIT)的社会群体里面获得了一只雌性大多豹子猿猴(6岁左右)。成年(2岁)雄性猕猿猴(macacamulatta)来自斯坦福大学戴维斯医学院的加州发展中国家类人猿学术研究里面心。在小鼠脑腌渍器(Zivic Instruments)上进行冠状腌渍,并在冰冷的人工脑脊髓液(ACSF)里面组织学V1皮质。经过处理过程后,适用适用Nova-Seq S2 100循环试剂盒(Illumina)进行DNA。

结果:在正常或病理发展只能(包含Dret囊肿)检查回路成熟的早期时序的主要盲点是,在不适用转性状昆虫的只能难以进入特定的细胞各种类型。即使改用复杂的遗传策略,身为的PV cIN也很难成为索科利夫卡。考虑到它们的丰度(它们代表所有抑制性cIN的40%)并且出现得相对较晚。更相当多地说,在本学术研究里面确定的进一步提高子备有了具比如说临床意义的神经纤维社会群体的出访途径。最明显的是,这些进一步提高剂可以通过性状疗法或调节神经纤维活性而潜在地用作减轻Dret囊肿的衰弱症状。作者证明了局部和全身施打可用作直接的病毒引导到大脑。通过局部施打,可能会改善局灶性抑郁症,PFC功能盲点或鲎记忆盲点。相比较,系统性引入病毒可用作需要下半年默许的只能,例如,纠正普遍性抑郁症发作或信念病和神经退行性结核病。作者的学术研究表明,对调节成份的宽松鉴定为外科手术后环境里面特定细胞各种类型的借助备有了站牌。重要的是,证明了我们的进一步提高子自由选择新方法可推广到其他性状。总体而言,我们发现了各别七个针对不同神经纤维社会群体和里面枢神经系统区域具独特抗原的进一步提高剂。即使改用了宽松的规范(对远距离老年人的自由依赖性> 90%),我们的新方法仍具除此以外的成功率(> 20%)。此外,正如移动性保守的性状组所预测的那样,作者测试的进一步提高子集在包含有机体在内的所有种群里面被证明具同等的自由依赖性和直接性。

Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).

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